Carestream Health, Inc.

BioMax Instructions TranScreen

Préparation d’échantillon
En règle générale, un échantillon préparé pour l’autoradiographie doit être complètement sec pour minimiser l’atténuation de l’émission bêta. Le fait de placer un buvard ou un échantillon mouillé dans un film ou un sachet hermétique en plastique entraîne une dégradation importante de la sensibilité et de la résolution, en particulier si l’on utilise des isotopes de faible énergie (ex. le 35S) et élimine complètement la détection du 3H. En outre, il est essentiel d’utiliser le matériel de buvardage qui ait le plus d’affinité avec la biomolécule à étudier lors d’un essai (ex. du nylon à charge positive pour un acide nucléique). Un choix approprié de la membrane maintient la radioactivité proche de la surface (et détermine le côté actif du buvard) qui peut être placée le plus près possible du film et du phosphore pour maximiser la sensibilité et la résolution spatiale.
Le fait qu’un buvard est capable d’arracher et de sonder à nouveau après le séchage pour l’autoradiographie pose quelques problèmes. En général, si les molécules absorbées par le buvard forment des réseaux appropriés avec la membrane et que le buvard est convenablement bloqué et sondé, l’arrachage et le nouveau sondage après séchage ne sont pas défavorablement affectés.
La simple définition opérationnelle du séchage à air est suffisante pour une utilisation avec le BioMax TranScreen, alors que la moindre humidité peut faire coller et/ou causer des problèmes statiques si un buvard est exposé à la surface d’un film. La surface BioMax TranScreen résiste efficacement à l’effet indésirable que l’eau et/ou la glace provoque sur le phosphore.

Chambre noire et éclairage inactinique
IMPORTANT : le film BIOMAX MS est extrêmement sensible à la lumière verte, jaune et bleue et ne doit être exposé qu’au filtre rouge d’éclairage inactinique GBX-2, équipé d’une ampoule de 7,5 ou 15 watts uniquement. L’utilisation d’autres filtres d’éclairage inactinique et d’ampoules plus puissantes augmente considérablement l’effet de voile de l’arrière-plan du film exposé. Veuillez consulter les instructions et mesures de précautions fournies avec le film. Le TranScreen est résistant à l’exposition à la lumière sur une période indéfinie. De plus, la période d’émission lumineuse après l’exposition au phosphore est suffisamment courte (en secondes) et ne nécessite aucune précaution particulière telle qu’une adaptation à l’obscurité de l’écran.
Mode d’emploi du système BIOMAX TRANSCREEN
ÉTAPE 1.
Sous des conditions appropriées de chambre noire, sortez le film de la boîte et insérez-le dans le classeur BIOMAX TRANSCREEN. Ce dernier est conçu pour minimiser l’effet voile dû à de mauvaises conditions de chambre noire. Pour en savoir plus sur les conditions appropriées de chambre noire, consultez la section concernant la chambre noire et l’éclairage inactinique.
ÉTAPE 2.
Placez le côté actif de l’échantillon sur la surface luminophore du classeur, comme indiqué sur le diagramme.
ÉTAPE 3.
Placez la combinaison film/écran dans une cassette avant de la fermer.
ÉTAPE 4.
La cassette doit être placée au congélateur (-60 à -80 °C) Le passage au congélateur est important pour optimiser la sensibilité du système.
ÉTAPE 5.
Après exposition, laissez la cassette se réchauffer à la température ambiante pendant au moins 15 minutes avant son ouverture. Cette mesure de précaution permet de ne pas abîmer les charnières de la cassette et de minimiser la condensation formée par l’eau sur le film exposé, l’échantillon et l’écran TranScreen.
ÉTAPE 6. Sous des conditions appropriées de chambre noire, ouvrez la cassette et désassemblez le montage. Le classeur BIOMAX TRANSCREEN a un coin entaillé qui facilite l’accès au film.