La préparation des échantillons, l'évaluation microscopique et la technique photographique sont autant de défis à relever pour les microscopistes électroniques. Cependant, c'est l'image photographique finale du spécimen qui vous permet d'évaluer et de communiquer vos résultats. Vous obtiendrez la qualité, la constance et la répétabilité nécessaires pour vos micrographies électroniques en suivant quelques directives de base relatives au stockage, à la manipulation et au développement des produits de micrographie électronique.

Stockage des films de micrographie électronique

En raison de leurs propriétés particulières, les films de micrographie électronique (ME) sont des produits photographiques susceptibles de s’altérer avec le temps. Ces altérations peuvent être accélérées si les films sont soumis à une chaleur excessive, à une hygrométrie relative élevée et à une interaction chimique avec des matériaux qui ne sont pas photographiquement inertes (comme certaines matières plastiques, solvants, laques, peintures et gaz). Un stockage des films très prolongé ou dans des conditions défavorables peut entraîner une perte de sensibilité, une intensification du voile, une modification du contraste ou une combinaison de tous ces effets. Vous pouvez prolonger la durée de vie de vos films de ME en respectant les règles simples suivantes.

Films non exposés

En règle générale, évitez les températures et l'humidité élevées. Les films de micrographie électronique peuvent être stockés à température ambiante (si celle-ci ne dépasse pas les 21 °C) dans leur emballage d’origine résistant à l’humidité, à une hygrométrie relative de 50 %.

Temps de réchauffage après le retrait du stockage au froid

Pour éviter la condensation d'humidité sur les surfaces froides des films, laissez-les se réchauffer et atteindre la température ambiante avant d’ouvrir le paquet étanche à la vapeur. Les temps de réchauffage dépendent de l’espace créé entre chaque carton pour une meilleure circulation de l’air à la sortie du stockage au froid. Cette durée est de 2 heures si les films ont été conservés au réfrigérateur et de 3 heures à la sortie du congélateur.

Films exposés

Développez les films dès que possible après l'exposition pour éviter la détérioration de l'image latente. Vous pouvez conserver les films de ME exposés pendant environ 72 heures si la température ne dépasse pas les 24 °C et l’hygrométrie relative est inférieure ou égale à 50 %. Si vous devez conserver les films plus longtemps, mettez-les au réfrigérateur, dans une boîte ou dans un bocal étanche pour les protéger de l’humidité. Ne laissez pas les films exposés dans les plateaux plus longtemps que nécessaire.

Films développés

Pour pouvoir conserver les films de ME sur une longue durée, vous devez porter une attention particulière aux procédures de développement. Consultez la section « Développement pour une image stable » de cette publication et suivez les instructions au pied de la lettre. Les négatifs et les tirages de ME peuvent être stockés à des températures normales inférieures ou égales à 21 °C. Vous devez les garder à un endroit sec, dont l’hygrométrie relative se situe entre 30 et 50 % : en dessous de 30 %, les films deviennent excessivement fragiles, tandis qu’une valeur au-dessus de 60 % favorise le développement des moisissures et champignons. Il est préférable de maintenir la température et l'humidité constantes. Si la température est temporairement un peu plus élevée, les films ne devraient pas en souffrir tant que l’humidité relative est inférieure à 40 %. Les températures supérieures à 24 °C associées à une hygrométrie relative supérieure à 60 % accélèrent le développement de moisissure et de champignons, la détérioration de l’image ainsi que l’adhésion des films les uns aux autres ou le ternissement de la surface des négatifs.

Protégez vos négatifs et vos tirages contre les vapeurs de certains composés sulfureux (tels que l’hydrogène sulfuré ou le gaz de charbon) et des émissions d’oxydes d’azote, de peroxydes, de formaldéhyde, d’ozone et de tout autre gaz oxydant nocif. Bien que les peintures au latex ne posent aucun problème, les vapeurs provenant des peintures à base d’huile peuvent causer une décoloration importante. Ne remettez pas des négatifs dans une zone fraîchement peinte avec des peintures à base d’huile pendant au moins 4 semaines.

Manipulation en chambre noire et utilisation de lampes inactiniques

Comme l'émulsion et les côtés latéraux des films peuvent être facilement rayés par une manipulation brutale et que des doigts mouillés peuvent laisser des traces sur les surfaces, l'observation de plusieurs précautions est nécessaire lors de la manipulation des produits photographiques de ME dans la chambre noire. Les directives suivantes concernant la manipulation en chambre noire vous permettront d’éviter les problèmes les plus courants.

1. Vérifiez qu’aucune lumière ne filtre dans votre salle de chargement et de développement des films. Pour ce faire, éteignez toutes les lumières et restez dans la pièce obscure pendant environ 10 minutes. Au cours de cette période, vos yeux vont s’adapter à l’obscurité et vous serez alors en mesure de voir toute lumière qui filtre par des fentes autour de la porte, par les conduits de ventilation ou de chauffage ou par d’autres endroits.
2. Avant d'éteindre les lumières pour charger ou développer les films, assurez-vous que tous les objets dont vous avez besoin sont à portée de main. Si vous stockez les films exposés dans leurs boîtes d’origine, veillez à les étiqueter clairement. Rangez les boîtes des négatifs exposés et celles de films non exposés séparément pour éviter d’exposer un matériau à deux reprises.
3. Respectez les recommandations relatives aux conditions d’éclairage inactinique indiquées sur la notice accompagnant les paquets de films. Pour en savoir plus, consultez la section sur l’utilisation de l'éclairage inactinique ci-dessous.
4. Manipulez les films par leurs bords pour éviter les rayures ou éraflures.
5. Assurez-vous que vos mains sont propres et complètement sèches avant de manipuler des films.
6. Retirez toutes les particules de poussière, de fibres de papier ou de plastique qui ont pu se déposer sur le film au cours de la livraison. Si ces particules ne sont pas retirées avant l’exposition, elles peuvent provoquer des taches de poussière (piqûres) sur le négatif et salir la colonne du microscope. Pour éliminer ces particules, brossez la surface de l'émulsion avec une brosse sèche et propre en poils de chameau. Vous pouvez également utiliser un jet d’air, d’azote ou de gaz sous pression pour éliminer ces particules de la surface. Si vous utilisez du gaz sous pression, assurez-vous qu'il est propre, exempt d'huile et sec et que la pression de l’air est inférieure à 20 psi : une pression excessive peut endommager la surface de l’émulsion.
7. Sortez les films de leur emballage et chargez-les dans le support approprié avant le prépompage. N’effectuez pas le prépompage du film dans les emballages ouverts contenant du carton de protection, car la durée de prépompage sera indûment prolongée et l'humidité de ces feuilles de carton contaminera rapidement l'huile de la pompe mécanique.
8. Évitez toute exposition critique sur les bords du film. Les bords extérieurs (6,35 mm) peuvent être endommagés lors de la manipulation ou du développement.

Utiliser un éclairage inactinique

La manipulation et le développement des films de micrographie électronique doivent se faire dans des conditions d’éclairage inactinique appropriées. Carestream Molecular Imaging recommande l'utilisation d'une lampe inactinique équipée d'un filtre inactinique GBX-2 et d'une ampoule dépolie de 15 W pour une protection et une visibilité maximales dans la chambre noire. La lampe inactinique doit être placée de manière à ce qu’elle soit toujours à une distance supérieure ou égale à 1,2 mètre du film.

Éviter les marques d'électricité statique

Lorsque les films font l’objet de frottements, ils peuvent accumuler une charge d’électricité statique positive ou négative, en particulier si l’humidité relative est faible. Le film tente alors de récupérer un état neutre en transférant des électrons vers ou depuis d'autres objets. Ce transfert se produit parfois lentement et sans effets néfastes, mais il arrive que la charge s'accumule plus vite qu'elle ne peut se dissiper en toute sécurité. Dans ces cas-là, une décharge soudaine produit de la chaleur, de la lumière et des rayons ultraviolets. Ce rayon ultraviolet forme une image latente sur le film sous la forme de la décharge statique et produit des images indésirables sur vos négatifs développés. Les marques en forme de branches que vous voyez parfois sur les négatifs sont causées par de telles décharges statiques. Elles sont caractéristiques d'une charge négative qui s’est déchargée sur un petit point ou objet. Les marques d'électricité statique peuvent toutefois prendre un certain nombre d'autres formes qui ne sont pas aussi facilement reconnaissables. Des taches diffuses dont le centre est sombre apparaissent parfois lorsqu'une charge s'accumule sur le plateau du film et se décharge ensuite sur le film. Carestream prend toutes les précautions possibles pendant la fabrication et l'emballage afin d'éviter l'accumulation de charges statiques sur les produits sensibles. Vous pouvez éviter les problèmes causés par l’électricité statique en suivant les consignes suivantes :

• Évitez de faire des mouvements brusques susceptibles de causer des frottements lors de la manipulation des films.
• Si possible, maintenez l’humidité relative entre 40 et 60 % dans les endroits où vous chargez et déchargez les films.
• Déplacez lentement les pièces du plateau et retirez doucement les composants lorsque vous chargez ou déchargez un film.

	Les taches rondes avec une partie sombre au centre sont dues à une décharge provenant d’un objet proche sur un film chargé positivement.
	Les marques d'électricité statique en forme de branche sont dues à une décharge provenant d’un petit objet ou point chargé négativement.