Alguns desafios enfrentados por microscopistas de elétrons são: preparação da amostra, avaliação microscópica e técnica fotográfica. Entretanto, é essa imagem fotográfica final da amostra que permite que você avalie e divulgue suas descobertas. Você pode obter a qualidade, consistência e repetibilidade necessárias em suas micrografias de elétrons seguindo algumas diretrizes básicas de armazenamento, manuseio e processamento de produtos de micrografia de elétrons.

Armazenar filmes para micrografia de elétrons

Os filmes para micrografia de elétrons (EM) são produtos fotográficos e, por causa de suas propriedades especiais, eles podem mudar com o tempo. Essas mudanças podem ser aceleradas por altas temperaturas, umidade relativa elevada e interação química com materiais que não são fotograficamente inertes (como alguns plásticos, solventes, verniz, tintas e gases). Armazenar filmes por um período muito longo ou sob condições adversas pode levar a uma perda de velocidade, a um aumento do desfoque, a uma alteração no contraste ou a uma combinação de todos esses efeitos. Você pode prolongar a vida útil dos seus filmes EM aderindo a estas regras simples.

Filmes não expostos

Como regra geral, evite temperaturas e umidade elevadas. Os filmes para micrografia de elétrons podem ser armazenados a temperatura ambiente se ela não ultrapassar 21 °C em sua embalagem original a prova de umidade, a uma umidade relativa de 50%.

Tempo de aquecimento após a remoção do armazenamento frio

Para evitar a condensação da umidade em superfícies de filme frias, deixe os filmes esquentarem até temperatura ambiente antes de abrir a embalagem a vácuo em uso. O tempo de aquecimento depende da separação das caixas umas das outros após a remoção de dentro do armazenamento frio para melhor circulação de ar. O tempo de aquecimento é de 2 horas a partir do refrigerador ou de 3 horas a partir do freezer.

Filmes expostos

Processe os filmes o mais rápido possível após a exposição para evitar deterioração da imagem latente. Você pode armazenar filmes EM expostos por cerca de 72 horas se a temperatura estiver abaixo de 24 °C e a umidade relativa for inferior a 50%. Se você precisar armazenar os filmes por mais tempo, proteja-os de umidade fechando-os em uma lata ou recipiente a vácuo e coloque-os em um refrigerador. Não deixe os filmes expostos no vidro por mais tempo do que o necessário.

Filmes processados

Para guardar filmes EM em longo prazo, é necessário prestar atenção especial aos procedimentos de processamento. Consulte a seção “Processamento para estabilidade de imagem” deste documento e siga atentamente as instruções de processamento. Impressões e negativos EM podem ser armazenados a temperaturas normais de 21 °C ou menos. Eles devem ser mantidos em um local seco onde a unidade relativa esteja entre 30 e 50%; uma umidade relativa abaixo de 30% causa fragilidade, enquanto umidade relativa acima de 60% fomenta o crescimento de fungo e mofo. É melhor manter a temperatura e a umidade constantes. Se a temperatura estiver temporariamente mais alta, não deve haver problema se a umidade relativa for inferior a 40%. Temperaturas acima de 24 °C em conjunto com umidade relativa acima de 60% levam a um crescimento acelerado de fungo e mofo, deterioração da imagem, aderência de uma imagem a outra ou envernizamento das superfícies dos negativos.

Proteja seus negativos e impressões de vapores de determinados compostos de enxofre (como sulfeto de hidrogênio e gás de carvão) e de vapores de óxidos de nitrogênio, peróxidos, formaldeído, ozônio e outros gases oxidantes nocivos. Embora tintas à base de látex não apresentem problemas, os vapores de tinta-óleo podem causar descolorações graves. Não coloque os negativos de volta em uma área recém-pintada com tinta-óleo por, no mínimo, 4 semanas.

Manipulação em câmara escura e uso de luzes de segurança

Como a emulsão e as laterais de base dos filmes podem ser facilmente arranhados por um manuseio descuidado, e as superfícies podem ficar marcadas por contato com dedos engordurados, várias precauções devem ser seguidas ao manusear produtos fotográficos EM no quarto escuro. As diretrizes a seguir para a manipulação em câmara escura ajudarão a evitar os problemas mais comuns.

1. Verifique se há vazamentos de luz na área de inserção do filme e na sala de processamento. Para fazer isso, apague todas as luzes e permaneça no quarto escuro por cerca de 10 minutos. Durante esse tempo, seus olhos se ajustarão ao escuro e você conseguirá ver se há alguma luz entrando na sala através de rachaduras na porta, pelos dutos de ventilação ou aquecimento ou por outras áreas.
2. Antes de apagar as luzes para inserir ou processar o filme, confira se tudo o que você precisa está a seu alcance. Se você armazenar filmes expostos em suas caixas originais, rotule-os de forma clara. Mantenha as caixas de negativos expostos longe das caixas de filmes não expostos para evitar expor o mesmo material duas vezes.
3. Use apenas as condições de luz de segurança recomendadas, conforme indicado no folheto de instruções que vem junto com os filmes. Para mais informações, confira a seção sobre uso de luzes de segurança abaixo.
4. Manuseie os filmes pelas bordas para evitar arranhões e atrito.
5. Confira se suas mãos estão limpas e completamente secas ao manusear os filmes.
6. Remova quaisquer partículas de poeira, fibras de papel ou plástico que possam ter sido depositadas no filme durante o transporte. Essas partículas, se não forem removidas antes da exposição, pode causar manchas de poeira indesejadas (pinhole) no negativo e contaminar a coluna do microscópio. Para remover essas partículas, passe uma escova de pelo de camelo seca e limpa na superfície de emulsão. Um jato de ar, nitrogênio ou gás pressurizado também pode ser usado para soprar as partículas para fora da superfície. Se usar gás pressurizado, confira se ele está limpo, seco e livre de óleos, e que a pressão do ar não está acima de 20 psi, já que pressão em excesso pode danificar a superfície de emulsão.
7. Remova o filme da embalagem e coloque o dentro do suporte adequado antes do pré-bombeamento. Não pré-bombeie o filme na embalagem aberta contendo o papelão protetor, já que o tempo de pré-bombeamento será estendido indevidamente e a umidade desses papelões rapidamente contaminará o óleo presente na bomba mecânica.
8. Evite exposição crítica nas bordas do filme. As bordas exteriores de 0,6 cm podem ser afetadas pelo manuseio ou processamento.

Usar luzes de segurança

Os filmes para micrografia de elétrons devem ser manuseados e processados sob condições de luz de segurança adequadas. A geração de imagem molecular da Carestream recomenda uma luminária de luz de segurança equipada com um filtro de luz de segurança GBX-2 e lâmpada fosca de 15 W para proteção máxima e maior visibilidade na câmara escura. Uma luz de segurança deve ser posicionada de forma que sempre esteja a 1,2 metros ou mais de distância do filme.

Evitar marcas de estática

Quando os filmes são sujeitos a atrito, eles se tornam positivamente ou negativamente carregados com eletricidade estática, principalmente quando a umidade relativa é baixa. Em seguida, o filme tenta retornar ao estado neutro por meio da transferência de elétrons de/para outros objetos. Às vezes, essa transferência ocorre lentamente sem efeitos adversos, mas algumas vezes a carga se acumula mais rapidamente do que consegue dissipar de forma segura. Nessas situações, uma descarga repentina produz calor, luz e radiação ultravioleta. A radiação ultravioleta forma uma imagem latente no filme no formato da descarga estática, produzindo imagens indesejadas nos seus negativos processados. As marcas semelhantes a galhos que às vezes aparecem em negativos são causadas por essa descarga estática. Elas são características de uma carga negativa que é descarregada em um pequeno ponto ou objeto. Entretanto, as marcas de estática podem ter diversos formatos que não tão facilmente reconhecíveis. Por exemplo, manchas difusas com centros escuros são produzidas quando uma carga se acumula no vidro do filme e em seguida se descarrega no filme. Durante a fabricação e o embalamento, a Carestream toma todas as precauções possíveis para evitar o acúmulo de cargas de eletricidade estática em produtos sensibilizados. As precauções a seguir ajudarão você a evitar problemas causados por estática:

• Evitar manusear o filme com movimentos bruscos que podem causar atrito.
• Se possível, manter a umidade relativa de 40 a 60% nas áreas onde você insere e remove o filme.
• Mova as peças da impressão lentamente, e retire os componentes lentamente ao inserir e remover o filme.

	Manchas circulares com centros escuros são causadas por uma descarga de um objeto próximo em uma filme positivamente carregado.
	Marcas de estática semelhantes a galhos são causadas por uma descarga de um objeto ou ponto pequeno carregado negativamente.